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β-木糖苷酶(β- xylosidase)測定試劑盒說明書

點擊次數:1236 發布時間:2018/4/13
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產品說明:
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細菌和真菌等生物體,是催化木聚糖類半纖維素降解的關
鍵酶,產物木糖可作為碳源應用于微生物發酵。另外,β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應用于造
紙工業,比傳統的漂白法環保,具有廣泛的應用價值。
β-木糖苷酶催化對硝基苯酚-β-D-木糖苷產生對硝基苯酚,對硝基苯酚在405nm 處有特征吸收峰,
測定405nm 光吸收增加速率,可計算β-木糖苷酶活性。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提取
1. 植物樣本:稱取約0.1g 樣品,加1.0 mL 提取液充分冰浴勻漿,然后12000rpm,4℃,離心20min,
棄沉淀,取20μL 上清測定蛋白含量,剩余上清作為待測酶液。
2. 細菌、真菌樣本:收集約500 萬個細胞,加入1.0 mL 提取液,超聲波破碎(冰浴,功率300w,
超聲3 秒,間隔7 秒,總時間3min);然后10000rpm,4℃,離心10min,棄沉淀,取20μL 上
清測定蛋白含量,剩余上清置于冰上待測。
3. 標準液的處理:用試劑二將標準液稀釋至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0 ?mol/ml。

注意事項:
1、吸光度變化應該控制在0.05-0.6 之間。否則加大樣品量或稀釋樣品,注意計算公式中參與計算
的稀釋倍數要相應改變。
2、樣品蛋白質含量需要另外測定,可選用考馬斯亮藍法蛋白含量測定試劑盒進行測定。

 
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